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Protocolo para NIH 3T3

Protocolo para NIH 3T3


células NIH3T3 se utilizan ampliamente en los laboratorios de investigación para la virología, la celular y los experimentos de biología molecular. La línea celular de fibroblastos de embriones de ratón fue desarrollado por George Todaro y Howard Green en 1962 en la Universidad de Nueva York.

Medio

NIH3T3 células crecen adheridas a los platos de plástico en una incubadora a 37 grados centígrados (99 grados Fahrenheit). Su medio de cultivo es de Dulbecco Modificado Medio de Eagle suplementado con suero de ternera 10% - no el 10% de suero bovino fetal que otras líneas celulares prefieren.

Propagación

Dividir las células NIH 3T3 cada 2 a 3 días - es importante que no se les permita llegar a ser demasiado densa. Se elimina el medio de cultivo agotado y lavar el plato con solución salina tamponada con fosfato. Se incuban las células en tripsina para separar las células y controlar la separación con un microscopio. Cuando se redondean y se separaron las células, agitar suavemente con una pipeta. Añadir medio de crecimiento completo para detener la reacción enzimática. Vuelva a la placa de las células a 300.000 células por 10 cm (3,9 pulgadas) plato.

Usos

NIH3T3 se utilizan para crecer Virus o función de la leucemia murina como células inmovilizadas, o capas de alimentación, que suministran factores de crecimiento necesarios para las células tales como las células madre y queratinocitos. Ellos fueron cultivadas en la seda de araña en experimentos diseñados para descubrir biomateriales con potencial para la regeneración de tejidos.


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