Cómo utilizar bacterias en Ingeniería Genética

Las bacterias son herramientas útiles en la modificación genética. Mediante el uso de plásmidos, las porciones circulares de ADN bacteriano intercambiables, organismos, tales como otras bacterias, pueden ser transformados genéticamente. Esta guía se describen los métodos básicos que intervienen en el uso de bacterias para la ingeniería genética de otro organismo.

Instrucciones

Preparación del gen de interés

1 Obtener una muestra de la primera especie de bacterias en muestras de secreciones de la colonia cerrada con un asa estéril.

2 Agitar el bucle inoculado en un tubo de ensayo a través de un baño de agua a aproximadamente 48 grados Celsius durante cinco segundos.

3 Añadir unos mililitros de enzimas de restricción para el tubo de ensayo y el bucle climatizada, inoculado. Esta enzima de restricción varía en función del gen de interés que se transfiere a las otras especies bacterianas.

La transformación de las otras especies de bacterias

4 Sumergir un segundo bucle estéril en una colonia de la segunda especie de bacterias, la que debe ser transformado.

5 Transmitir la bacteria de forma homogénea en una placa de Petri que contiene medio de agarosa deslizando el bucle inoculado a través de la agarosa.

6 Deje que las bacterias se incuban durante dos días en una incubadora, de manera que se forman colonias de bacterias.

7 Añadir la mezcla creado anteriormente que contiene el gen de interés a la placa de Petri que contiene las colonias bacterianas.

8 Deje que las bacterias se incuban durante dos días en la incubadora. Esto permite que la especie a la absorción de los genes añadidos al plato e insertarlos en sus genomas.

9 Idear un método para probar las bacterias transformadas para ver si se asimilan los genes. Por ejemplo, si el gen añadido otorga a las bacterias resistencia a los antibióticos, puede ser práctico añadir los discos de ampicilina a la placa de agar. Si sobreviven, ellos tomaron el gen.

Consejos y advertencias

• Al elegir un gen de utilizar para la transformación, elegir un gen que se puede tomar de otra bacteria fácilmente.
• También asegúrese de recoger un gen que puede ser probado para ver si el procedimiento funciona. Por ejemplo, un gen que hace que las bacterias se iluminan es fácilmente comprobable por la vista.
• Tenga mucho cuidado cuando se trabaja con bacterias, letales o no letales.
• Lávese las manos con jabón antibacteriano antes, durante y después de cualquier trabajo con las bacterias en la ingeniería genética.