Las técnicas para el subcultivo Líneas Celulares

Los científicos mantienen una amplia variedad de células en el laboratorio para añadir a nuestra comprensión de cómo las células crecen, se multiplican y mueren. Para mantener las células, los científicos dividen periódicamente - subcultivo o Split - en medio de crecimiento fresco.

Subcultura

Las células se cultivan en suspensión en medio de crecimiento o unido a placas de Petri de plástico o frascos. Como las células crecen se vuelven más denso, utilizar los nutrientes y excretar productos de desecho en el medio. Por lo tanto, las células deben ser divididos regularmente en números más pequeños y se les dio medio fresco - por lo general a un número específico de células por placa.

Método

Contar y diluir las células en suspensión en medio fresco. Para las células instalados, desmonte medio gastado y lavar suavemente las células con un tampón de solución salina. Exponer las células a una solución enzimática o sal para romper las conexiones célula-célula y célula-plato - tripsina es más comúnmente utilizado. Detener la reacción enzimática con la adición de suero animal, lugar de la mezcla de células en un tubo y centrifugado en una centrifugadora. Retire el líquido, volver a suspender suavemente las células en medio fresco, contar y dispersarlos en la densidad requerida.

consideraciones

células de subcultivo en un medio estéril con equipo estéril para evitar la contaminación bacteriana o fúngica. La densidad celular, la cantidad de tiempo en tripsina y la frecuencia subcultivo dependen todos del tipo de célula. Utilizar un microscopio para supervisar periódicamente las células.